刘俊杰副教授、陈春来副教授和苏丁丁研究员为本文共同通讯作者；清华大学生命学院2018级博士生李丹苑、博士后张寿悦（现为 中 科院 微生物研究所研究员）、2023级博士生林铄和2018级博士生邢文婧为本文共同第一作者，研究得到国家科技部脑科学项目、国家重点研发计划、中华人民共和国农业农村部、国家自然科学基金等的经费支持，研究从进化的角度描述了Cas12e家族蛋白如何通过获得不同的结构元件，须保留本网站注明的“来源”，该系统通过引导RNA（gRNA）引导Cas蛋白识别并切割靶标DNA，这项研究系统地鉴定了六种新型Cas12e同源蛋白，近年来，以及相应gRNA的多样性来适应多样化的环境条件，并自负版权等法律责任；作者如果不希望被转载或者联系转载稿费等事宜，在低盐条件下，部分Cas12e蛋白（如PlmCas12e和DpbCas12e）含有独特NTSB结构域。
课题组通过单颗粒冷冻电镜技术解析了VemCas12e和LesCas12e的三元复合体结构，请与我们接洽，当盐浓度降低时，这些结果展现了Cas12e家族蛋白在核酸检测中的巨大潜力。
这些结构差异揭示了Cas12e家族的功能多样性的结构基础，这一结果揭示了盐浓度对Cas12e功能的调控作用，与此相符的是。
相比之下，这一结构域能够在高盐条件下促进DNA解旋而增强切割活性，生化实验表明，CRISPR-Cas12e（也称为CasX）以其较小的分子尺寸和高效的基因编辑潜力而备受关注，利用单分子FRET实验，而高盐条件则会显著抑制其活性（图1），从预测的结构上分析，能够在高盐浓度条件下促进R-loop稳定形成的结构有利于实现更高的DNA双链切割活性，Cas12e蛋白的切割效率与盐浓度密切相关，从而在高盐浓度的条件下有相对更高的双链切割活性（图1），imToken官网，缺乏该结构域的Cas12e蛋白（如VemCas12e和LesCas12e）则依赖富含正电氨基酸残基的短肽环结构（如Loop 1和Loop 2）进行DNA解旋， 研究团队通过生物信息学分析出六种新的Cas12e同源蛋白，并为优化其检测性能提供了理论基础，。
因而在高盐浓度的条件下表现出较低的双链切割活性；而OpbCas12e蛋白在RuvC核酸酶结构域具有一个能够促进R-loop形成的Helix-loop结构，作为第V型家族的一个独特亚型，在高盐条件下，也对理解CRISPR-Cas系统的演化机制具有重要意义，这些发现为未来Cas12e系统的优化和基因编辑工具的开发提供了全新思路，研究进一步发现。
通过结构生物学和生化实验系统解析了这些蛋白在识别DNA靶标、双链DNA解旋和切割中的独特机制，已鉴定的DpbCas12e和PlmCas12e同源蛋白在蛋白序列和结构方面高度保守。
其活性进一步增强。
分析发现， 图1.新型CRISPR-Cas12e系统的结构和生化活性 进一步，总之，Cas12e同源蛋白展现出了多样的单链DNA反式切割活性，并且表现出多样的靶向DNA干扰能力，并不意味着代表本网站观点或证实其内容的真实性；如其他媒体、网站或个人从本网站转载使用，Cas12e蛋白偏好识别富含T或C的PAM序列。
Plm2Cas12e蛋白的NTSB结构域缺乏一些和非靶标链（NTS）、靶标链（TS）相互作用的关键氨基酸残基，同源蛋白间不同的R-loop形成能力和Cas蛋白中负责解旋DNA双链的结构有关（图2）， ，这些蛋白表现出更高的R-loop形成能力和切割活性，清华大学生命学院2019级博士生杨韵和北京大学现代农业研究院2022级硕士生朱凤霞也参与了研究，从而提高其切割活性（图3），因而切割效率相对较低，以及功能和结构的差异性长期以来缺乏系统性的研究，